主要用途
活體細胞溶酶體膜通透性(LMP)/完整性吖啶橙熒光檢測試劑是一種旨在通過吖啶橙吸收和細胞內(nèi)再分布檢測技術(shù),選擇性地聚集在線粒體內(nèi)呈現(xiàn)熒光染色,即存在于或由溶酶體釋放到細胞漿的熒光染料的不同熒光強度變化,來分析和觀察溶酶體膜通透性的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種活體細胞溶酶體(動物、人體、昆蟲等)膜通透性的檢測。產(chǎn)品嚴格無菌,即到即用,活體檢測,分辨率高,操作簡捷,性能穩(wěn)定。
技術(shù)背景
溶酶體(lysosome)是一種動態(tài)性的、多態(tài)性的、含有水解酶的細胞器,具有接受和降解來自于分泌性、內(nèi)吞性(endocytic)、自噬性(autophagic)、吞噬性(phagocytic)膜運轉(zhuǎn)通路中的大分子。其功能是膜依賴性,具有解毒和防御作用。溶酶體膜是溶酶體內(nèi)基質(zhì)和胞漿之間的生理屏障,為整合性糖蛋白,防止細胞自我降解。一旦溶酶體膜去穩(wěn)定(destabilization),例如堿性化或內(nèi)容物移位(translocation),將導致質(zhì)子和水解酶外漏,而造成細胞器功能異常,進而產(chǎn)生細胞壞死、凋亡,以及病理癥狀,例如朊病毒腦病(prion encephalopathies)、阿茨罕默病、心肌缺血、脊髓灰質(zhì)炎病毒感染、補體激活型肺損傷(complement activation-produced lung injury)、急性組織損傷等疾病。其中膜通透性增加,是溶酶體膜去穩(wěn)定性或去完整性的標志之一,溶酶體內(nèi)容物大量釋放到胞漿中,直接影響細胞的存活。吖啶橙(acridine orange;AO)是一種親溶酶體(lysomotropic)異染性(metachromatic)的熒光染料,在完整的溶酶體內(nèi),為質(zhì)子化(protonated)寡聚體(oligomeric)形式,呈現(xiàn)紅色熒光(激發(fā)波長555nm,散發(fā)波長617nm),而在胞漿內(nèi),為單體去質(zhì)子化形式,呈現(xiàn)綠色熒光(激發(fā)波長490nm,散發(fā)波長528nm)。吖啶橙進入溶酶體后重新分布,即吸收和細胞內(nèi)再分布(uptakeand redistribution),用于分析溶酶體膜通透性狀況。 |